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3.(10分,除标注外,每空1分)(1)碱基互补配对原则dCTP耐高温的DNA聚合酶(Tag酶)14(2)I和Ⅱ用限制酶I和Ⅱ切割不仅能够使目的基因插人到T-DNA片段中,还可以防止质粒和目的基因自身环化或反向连接现象的发生(2分)(3)四环素或卡那霉素基因枪法、花粉管通道法病毒接种名求其的通白蛋【解析】(1)PCR过程遵循碱基互补配对原则,需要加人的原料是dATP、dTTP、dCTP和dGTP,酶是耐高温的DNA聚合酶(Tag酶);PCR技术大量扩增目的基因时,缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为0一2,因此一个目的基因经过3次循环需要消耗引物23+1-2=14个。(2)构建基因表达载体时,需要用限制酶I和Ⅱ分别对目的基因和质粒进行切割,这样不仅能够使目的基因插人到T-DNA片段中,还可以防止质粒和目的基因自身环化或反向连接现象的发生。话m加((3)由图可知,标记基因是四环素抗性基因和卡那霉素抗性基因,因此筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含四环素或卡那霉素的培养基上进行;植物基因工程中将目的基因导人受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法;要确认抗病毒番茄是否培育成功,从个体水平进行检测,要对培育出的番茄做病毒接种实验。由县AQ贾避盘A阳明
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1.(11分,除标注外,每空1分)(1)胰岛B反(逆)转录启动子和内含子均不含有(2分)民8空辩,桃书清照,代0),(2)PCR DNA双链复制要有一段已知胰岛素基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物(3分)(3)Ca+使大肠杆菌处于感受态:不良自曾1()【解析】(1)胰岛B细胞中胰岛素基因能够表达,在该细胞中可以获得胰岛素基因的mRNA,利用mRNA为模板通过反转录合成cDNA,cDNA中不含有启动子和内含子。辉两用()【补随(2)通过PCR对目的基因进行扩增,其原理是DNA双链复制,前提是要有一段已知胰岛素基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。(3)将胰岛素基因导入大肠杆菌,需要先用Ca2+处理大肠杆菌,使大肠杆菌处于感受态。站的因基的目国
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