本文从以下几个角度介绍。
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24.（14分)葡萄是两性花植株。无核葡萄品质优良，但抗寒性差，中国野生山葡萄具有较强抗寒性。回答下列问题：【.利用中国野生山葡萄培育抗寒无核葡萄品种(1)人工杂交。研究者对无核种子败育型（经过授粉受精，胚和胚乳一段时间后停止发育）葡萄植株进行▲、套袋、挂牌，一段时间后授以野生山葡萄的▲一，完成杂交。(2)胚离体培养。杂交后7-10天，剪取子房经75%乙醇或▲消毒后，用▲多次冲洗，用解剖针将其剥开，取胚珠接种于培养基上，培养、筛选获得抗寒无核葡萄植株。Ⅱ.利用基因工程技术对抗寒相关D基因的功能展开相关研究(3)科研人员利用pG载体首先构建了重组质粒，导入到敲除GAL4基因的酵母AH109菌株中，如下图所示。GAL4基因可编码酵母中具有转录激活功能的蛋白，AH109菌株为色氨酸、组氨酸缺陷型菌株，只有在添加相应氨基酸的培养基中才能生长。启动子终止子N编码色氨pG-D酸合成酶重组载体终止于P启动子>S3MEL1终止子启动子AH109菌株(GAL4基因已敲除)复制原点筛选P启动子：诱导型启动子，可被转录因子激活HⅡS3:编码组氨酸合成酶启动子MEL1:编码a-半乳糖苷酶，终止子自的PG-D可分解X-a-gal产生TRP1重组载体蓝色物质，否则为白色启动子终止子P启动子HIS3MEL1终止子重组菌株第24题图①为了能够筛选得到重组酵母，培养基的配方为下列选项中的▲组，此外还需额外添加▲，通过显色反应做进一步验证。A组：加色氨酸和组氨酸B组：不加色氨酸和组氨酸C组：加组氨酸，不加色氨酸D组：加色氨酸，不加组氨酸②实验结果表明抗寒相关D基因编码的蛋白质具有转录激活功能，完善实验分组及预期实验结果。对照组1：酵母菌导入pG-GAL4重组载体，实验结果：有菌落，变蓝。对照组2：酵母菌导入▲，实验结果：▲一。实验组：酵母菌导入▲，实验结果：(4)将抗寒相关D基因导入无核葡萄植株中，研究者常构建含D基因和抗除草剂基因的稳定表达载体，用含▲的培养基筛选愈伤组织，用PC方法筛选出▲植株，72小时▲诱导培养，检测植株中D蛋白的含量以判断抗寒能力。Z20名校联盟（浙江省名校新高考研究联盟）2024届高三第三次联考生物试题卷第8页共8页
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