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生物答案)
(2)过程Ⅱ中首先需用限制酶切割目的基因与质粒。该科研工作者采用BamHI和HindⅢ(3)取小鼠M的脾脏细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，先用选择培养基(切割后产生的黏性末端不同)这两种限制酶同时处理目的基因和质粒，与只用同一种限筛选得到具有能力的细胞，再将获得的上述细胞在多孔培养板上培养，用制酶处理目的基因和质粒相比，这样操作的优势是。用图中的质粒和目的基因ICAM-1检测，从中选择的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中培养，一段时构建重组质粒时，不能使用SmaI切割，原因是。将目的基因与质粒用DNA连对间后从小鼠腹水中提取实验用抗体。单克隆抗体的优点是接酶连接起来，就构成了重组质粒。为了使目的基因能够成功转录，目的基因上游要有的,下游要有(4)若进一步比较实验用抗体和31I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分(3)构建重组质粒后，用C+处理大肠杆菌，使之成为细胞，然后导入重组质粒。为三组，请补充下表中的实验设计。(4)得到大肠杆菌工程菌后，若要检验SL基因是否成功表达，可以用技术，若没有出现相应的杂交带，则需要用作探针检验目的基因是否转录出mRNA。对照组(A)1311治疗组(B)单克隆抗体治疗组(C)6.(15分)生物技术已经渗入了我们生活的方方面面，比如哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是给GD模型小鼠腹腔给GD模型小鼠腹脑遗传学研究的新手段，该项技术为研究隐性基因功能提供了理想的细胞模型。如图表示研究罗注射0.1mL无菌生注射溶于0.1mL无人员利用小鼠获取单倍体胚胎干细胞的方法。理盐水菌生理盐水的1311方法一：卵母细胞8.(15分)I.生物碱是铁皮石斛的有效成分之一，应用组织培养技术繁殖其幼苗的流程如下：原球茎长芽，丛状苗长根幼苗新生营养芽—→之（类似愈伤组织）些方法二【→6→⊙@请回答：M(1)选用野生营养芽进行组织培养时，需先将材料在的乙醇中浸泡10分钟，再用(1)方法一中，研究人员需对实验小鼠注射促性腺激素，使其,从而获得更多的卵母细胞，在体外选用特制的培养液经过早期胚胎培养至囊胚期，并从中分离、筛选5%次氯酸钠溶液浸泡以达到的目的。出胚胎干细胞。采用这种方法获得的单倍体胚胎干细胞称为孤雌单倍体胚胎干细胞(2)原球茎细胞的细胞壁（填“厚”或“薄”），将原球茎置于(A.LB培养基游(PG-haESCs).B.MS培养基+NAA/6-BA=1:10C.MS培养基+NAA/6-BA=10:1D.MS培养(2)采用方法二中，研究人员用方法去除细胞M中的雌原核，再对处理后的细胞进基十NAA/6BA=1:1)上可长成丛状苗。经过炼苗的幼苗移栽到实验室外前需要洗苗，◇行进一步的培养、分离和筛选，即可得单倍体胚胎干细胞(AGhaESCs)。目的是洗掉根部的琼脂，以免琼脂发霉引起烂根，洗苗时用(填“自来水”或“无(3)研究发现，小鼠单倍体胚胎干细胞存在自发二倍体现象，对此可以通过测定分析细胞内菌水”)。当分子的含量，或利用观察处于期细胞的染色体数目进行确定。Ⅱ.研究人员将fat-1基因与一只公兔的冻融精子在体外结合，再通过体外显微授精方式将(4)2016年，中国科学院动物研究所周琪实验室通过细胞融合技术将小鼠孤雄（雌）单倍体干携带有ft-1基因的精子注入到兔的卵母细胞中获得转基因胚胎，之后移植到代孕母兔输卵◇细胞和大鼠孤雌（雄）单倍体干细胞融合，创造出一种新型的干细胞一异种杂合胚胎干管内，最终得到4只转fat1基因兔，其体内的不饱和脂肪酸比普通兔子提高了约3倍。请细胞。此小鼠一大鼠杂交细胞中通常含有个染色体组，该技术突破了有性杂交回答：的局限，使成为可能。(3)在上述转基因实验中，将fat-1基因与动物表达载体pEF-neo连接，构建pEF-fat-1重组烯7.(15分)Graves病(GD)可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大质粒，需要的两类酶是限制性核酸内切酶和量细胞间黏附分子1(ICAM-1),导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。(4)在分离和培养兔子神经干细胞的过程中，当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行(I)用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入培养以得到更多数量的细胞。有关该细胞培养过程，下列叙述错误的是问多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出反应最强的培养孔所对应的小鼠M。A.在培养液中需要加人葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等(2)实验用骨髓瘤细胞置于恒温培养箱中37℃培养，融合前将部分培养细胞置于含B.为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素HAT的选择培养基中培养，一段时间后培养基中(填“有”或“无”)骨髓瘤细胞C.细胞培养应在CO,培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞的呼吸生长，说明培养基符合实验要求。D.为了防止细胞的分化，在培养皿底部往往要制备一层饲养层细胞生物（二十九）第3页（共4页）名师卷·周测卷生物（二十九）第4页（共4页）》